Kollisionsinduzierte Dissoziation
Die kollisionsinduzierte Dissoziation (englisch collision-induced dissociation, CID, synonym
) ist eine Methode zur Fragmentierung von Molekülionen in der Gasphase bei der Massenspektrometrie.[1]
Prinzip
Die kollisionsinduzierte Dissoziation führt bei der Massenspektrometrie zu einer weiteren Fragmentierung der Molekülionen. Durch die CID können uneindeutig identifizierte Fragmente nach Beschleunigung in einem elektrischen Feld durch Kollision mit neutralen Gasmolekülen (z. B. Helium, Stickstoff, Argon) erneut fragmentiert werden, um kleinere und eindeutig identifizierbare Fragmente zu erhalten. Durch die Kollision wird von den Molekülionen ein Teil der Energie als kinetische Energie aufgenommen, ein weiterer Teil der Energie wird als innere Energie absorbiert, die in Folge zu einer Fragmentierung der Molekülionen führt.
Verwendung
Die CID wird unter anderem in manchen Tripel-Quadrupol-Massenspektrometern, Reflektron-Flugzeitmassenspektrometern[2] (z. B. zur De-Novo-Peptidsequenzierung) und bei der Fourier-Transformations-Zyklotronresonanz-Massenspektrometrie verwendet. Die Fragmentierung kann in einem Reflektron alternativ zum CID durch einen LASER-induzierten Post-Source Decay (PSD) erreicht werden. Bei mehrfach geladenen Fragmenten kann die weitere Fragmentierung auch durch eine Electron Capture Dissociation oder durch eine Elektronenstoßionisation erreicht werden.[3][4][5] Eine weitere Form der Dissoziation ist z. B. die Infrarot-Multiphotonen-Dissoziation.[6]
Tripel-Quadrupol-Massenspektrometer
Bei einem Massenspektrometer mit drei Quadrupolen dient der erste Quadrupol als Massefilter zur Selektion der Molekülionen, der zweite Quadrupol als Kollisionskammer und der Dritte zur Auftrennung der Fragmente vor dem Detektor.
Fourier-Transformations-Ionen-Zyklotronresonanz-Massenspektrometrie
Die
(SORI-CID) ist eine CID-Methode bei der Fourier-Transformations-Ionen-Zyklotronresonanz-Massenspektrometrie. Dabei werden die Molekülionen kreisförmig in einer Ionenfalle beschleunigt und parallel dazu die Teilchendichte erhöht, was zur CID führt.
Kollisionen höherer Energien
(HCD oder HE CID, synonym
) ist eine Methode zur CID bei Orbitrap-Massenspektrometern, bei denen die Fragmentierung außerhalb der C-Falle erfolgt.[7] Dabei wandern die Molekülionen durch die C-Falle in die Kollisionskammer (eine Oktupol-Kollisionszelle) und zurück über die C-Falle zur Injektion in das Orbitrap. HCD besitzt einen höheren Cut-off-Wert bei der Analyse der Massen und kann dabei mit einer Isobarenmarkierung verwendet werden. Die Kollisionsenergie bei der HCD liegt im oberen Bereich der kollisionsinduzierten Dissoziationen niedrigerer Energie bei unter 1000 Elektronenvolt.[7][8]
Fragmentierungsformen
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Bei der homolytischen Spaltung behält nach der Dissoziation jedes Fragment eines der Elektronen aus der gespaltenen Bindung.[9] Dagegen erhält bei der heterolytischen Spaltung eines der beiden Fragmente beide Elektronen der gespaltenen Bindung.[10] Die Spaltung kann auch räumlich getrennt von der Ladung des Molekülions sein (engl.
),[11][12] was bei der Tandem-Massenspektrometrie auftreten kann.[13]
Siehe auch
Einzelnachweise
- ↑ J. M. Wells, S. A. McLuckey: Collision-induced dissociation (CID) of peptides and proteins. In: Methods in enzymology. Band 402, 2005, ISSN 0076-6879, S. 148–185, doi:10.1016/S0076-6879(05)02005-7, PMID 16401509.
- ↑ A. P. Kafka, T. Kleffmann, T. Rades, A. McDowell: The application of MALDI TOF MS in biopharmaceutical research. In: International journal of pharmaceutics. Band 417, Nummer 1–2, September 2011, ISSN 1873-3476, S. 70–82, doi:10.1016/j.ijpharm.2010.12.010, PMID 21147205.
- ↑ J. P. Reilly: Ultraviolet photofragmentation of biomolecular ions. In: Mass spectrometry reviews. Band 28, Nummer 3, 2009, ISSN 1098-2787, S. 425–447, doi:10.1002/mas.20214, PMID 19241462.
- ↑ K. F. Medzihradszky: Peptide sequence analysis. In: Methods in enzymology. Band 402, 2005, ISSN 0076-6879, S. 209–244, doi:10.1016/S0076-6879(05)02007-0, PMID 16401511.
- ↑ G. Hart-Smith: A review of electron-capture and electron-transfer dissociation tandem mass spectrometry in polymer chemistry. In: Analytica chimica acta. Band 808, Januar 2014, ISSN 1873-4324, S. 44–55, doi:10.1016/j.aca.2013.09.033, PMID 24370092.
- ↑ A. Guthals, N. Bandeira: Peptide identification by tandem mass spectrometry with alternate fragmentation modes. In: Molecular & cellular proteomics : MCP. Band 11, Nummer 9, September 2012, ISSN 1535-9484, S. 550–557, doi:10.1074/mcp.R112.018556, PMID 22595789, PMC 3434779 (freier Volltext).
- ↑ a b J. V. Olsen, B. Macek, O. Lange, A. Makarov, S. Horning, M. Mann: Higher-energy C-trap dissociation for peptide modification analysis. In: Nature methods. Band 4, Nummer 9, September 2007, ISSN 1548-7091, S. 709–712, doi:10.1038/nmeth1060, PMID 17721543.
- ↑ Kermit K. Murray, Robert K. Boyd, Marcos N. Eberlin, G. John Langley, Liang Li, Yasuhide Naito: Definitions of terms relating to mass spectrometry (IUPAC Recommendations 2013). In: Pure and Applied Chemistry. 85, 2013, S. 1515–1609, doi:10.1351/PAC-REC-06-04-06.
- ↑ Eintrag zu homolysis (homolytic). In: IUPAC (Hrsg.): Compendium of Chemical Terminology. The “Gold Book”. doi:10.1351/goldbook.H02851 – Version: 2.3.3.
- ↑ Eintrag zu heterolysis (heterolytic). In: IUPAC (Hrsg.): Compendium of Chemical Terminology. The “Gold Book”. doi:10.1351/goldbook.H02809 – Version: 2.3.3.
- ↑ C. Cheng, M. L. Gross: Applications and mechanisms of charge-remote fragmentation. In: Mass spectrometry reviews. Band 19, Nummer 6, 2000 Nov-Dec, ISSN 0277-7037, S. 398–420, doi:10.1002/1098-2787(2000)19:6<398::AID-MAS3>3.0.CO;2-B, PMID 11199379.
- ↑ Michael L Gross: Charge-remote fragmentation: an account of research on mechanisms and applications. In: International Journal of Mass Spectrometry. 200, 2000, S. 611–624, doi:10.1016/S1387-3806(00)00372-9.
- ↑ unbekannt: Remote-site (charge-remote) fragmentation. In: Rapid Communications in Mass Spectrometry. 2, 1988, S. 214–217, doi:10.1002/rcm.1290021009.
